Este preparado de conducto raquídeo coloreado con la técnica tricrómica de Masson es de utilidad para observar las características histológicas de la médula espinal, así como de las vértebras y los músculos paravertebrales. Esta técnica permite una clara diferenciación entre el colágeno del tejido conjuntivo (color turquesa) y el músculo y otras estructuras (violeta).
Observe a menor aumento la vértebra seccionada en forma transversal con el cuerpo en proceso de osificación. Por fuera constate la presencia de tejido muscular paravertebral. En el conducto raquídeo por dentro del periostio se reconoce una lámina de tejido conjuntivo denso que corresponde a la duramadre; entre ella y el periostio se encuentra el espacio epidural ocupado por tejido adiposo y vasos. Por dentro de la duramadre se puede encontrar la aracnoides y el espacio subaracnoideo con vasos de mayor calibre. En íntimo contacto con la superficie medular observe la piamadre.
En el centro del conducto raquídeo reconozca la médula espinal, con su perfil ovalado en el corte transversal, interrumpido por la fisura media ventral. Identifique el epéndimo en posición central.
A mediano aumento explore la distribución de sustancia gris y sustancia blanca en el órgano. La sustancia gris, localizada centralmente, con una disposición en forma de H, con dos astas anteriores (ventrales) y dos astas posteriores (dorsales) y la comisura gris. Las astas ventrales, voluminosas, dirigidas hacia adelante y afuera, no alcanzan la superficie medular. Las astas dorsales, más delgadas, dirigidas hacia atrás y afuera, llegan a contactar con la superficie medular.
La sustancia blanca se encuentra en posición periférica, distribuida en los cordones posteriores, laterales y anteriores.
Las dimensiones, disposición y proporción entre sustancia gris y blanca presenta variaciones en los diferentes segmentos y permite identificar la región (cervical, dorsal, lumbar, sacra) correspondiente a la sección.
A mayor aumento:
En los cordones de la sustancia blanca pueden observarse secciones transversales de las fibras mielínicas presentes en los haces medulares ascendentes y descendentes, aunque esta técnica no permite observarlos en detalle.
En la sustancia gris se reconocen los cuerpos neuronales, con núcleo vesiculoso, eucromático, con nucléolo evidente, rodeado de un pericarion abundante, con presencia de corpúsculos de Nissl. Observe la diversidad de tamaño de los somas neuronales en las distintas regiones de la médula espinal, como las grandes motoneuronas del asta ventral o las pequeñas neuronas del asta dorsal.
Es posible identificar agrupamientos neuronales en la sustancia gris (núcleos y láminas de Rexed), aunque con esta técnica no se destacan tanto como con otras. Algunos de las láminas y núcleos que se pueden identificar: núcleo marginal (lámina I), la sustancia gelatinosa de Rolando (lámina II), láminas III-IV con el núcleo propio, lámina VII con la columna de Clarke y neuronas de los núcleos que forman el asta lateral en segmentos torácicos y lumbares superiores, lámina IX con los núcleos motores del asta ventral y lámina X (comisura gris).
Tanto en la sustancia blanca como en la gris se observan células gliales, aunque esta técnica sólo permite diferenciar los núcleos. Pueden observarse los ependimocitos recubriendo el conducto ependimario.
A los costados de la médula espinal se pueden observar cortes de las raíces nerviosas dorsales y ventrales, con fibras nerviosas. En este corte no se observan los ganglios de la raíz dorsal.
Rodeando al conducto raquídeo se puede observar a los músculos paravertebrales. Con esta técnica permite diferenciar muy bien el tejido conjuntivo del músculo. Observe músculo estriado esquelético en corte longitudinal y transversal. Identifique los husos neuromusculares (2, 3) dispersos entre los haces de fibras musculares extrafusales. A mayor aumento identifique en las secciones transversales la cápsula y las fibras intrafusales.
A nivel de la vértebra en osificación, observe el aspecto que adquieren con esta técnica el hueso, el cartílago hialino y la zona donde ocurre el proceso de osificación endocondral:
a) Zona de cartílago hialino en reposo: observe los condrocitos en sus condroplastos. Este sector presenta iguales características que los otros preparados de cartílago hialino. En esta zona no se comprueba la presencia de células en proliferación.
b) Zona de cartílago en proliferación o seriado. Los condrocitos sufren mitosis formando grupos isogénicos axiales de disposición longitudinal y paralelos entre sí (en pilas de monedas).
c) Zona de cartílago hipertrófico. Observe el aumento de tamaño de los condrocitos y la coloración pálida de su citoplasma debido a la acumulación de glucógeno.
d) Zona de cartílago en degeneración y muerte. Note algunos condroplastos vacíos y otros con restos de condrocitos en proceso de degeneración.
e) Verifique la presencia de vasos sanguíneos frente a la línea de erosión.
f) Más profundamente identifique trabéculas de 3 tipos:
Trabécula directriz: es la más próxima a la zona de degeneración. Está formada por un eje de matriz cartilaginosa mineralizada de coloración basófila pálida. Este tipo de trabécula no presenta células asociadas.
Trabécula osteoide: se caracteriza por tener un eje de matriz cartilagiosa mineralizada rodeada de matriz ósea no mineralizada (de color magenta) sintetizada por osteoblastos que se encuentran en la superficie de la trabécula.
Trabécula osiforme: en esta trabécula los osteoblastos quedan incluidos completamente dentro de la misma, ya que continúan secretando matriz y se diferencian en osteocitos. La matriz se va mineralizando progresivamente. Localice osteoclastos a este nivel.
En los espacios dejados entre las trabéculas podrá reconocer vasos sanguíneos y una gran población de células heterogéneas en morfología, que corresponden al tejido mieloide.
Reconozca las trabéculas óseas. Note además la presencia de abundantes osteoblastos asociados a todas las trabéculas.